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怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢？
時(shí)間:2020-06-12 09:24來(lái)源: 作者:班德液氮罐 點(diǎn)擊:
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怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢？一般來(lái)講，凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力，所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作，以下是由液氮罐整理的資料，僅供參考。
1、預(yù)先配制凍存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷；
2、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細(xì)胞（盡可能溫和）；
3、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中，用滴管輕輕吹打混勻。
4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液，密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期。
5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力，如果有程序降溫器（放在-80℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐）最好；或者可以在4℃，2h；
再總結(jié)一句，一般細(xì)胞在-80℃存放半年左右，在液氮里可以放置更長(zhǎng)時(shí)間。
1、預(yù)先配制凍存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷；
2、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細(xì)胞（盡可能溫和）；
3、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中，用滴管輕輕吹打混勻。
4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液，密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期。
5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力，如果有程序降溫器（放在-80℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐）最好；或者可以在4℃，2h；
再總結(jié)一句，一般細(xì)胞在-80℃存放半年左右，在液氮里可以放置更長(zhǎng)時(shí)間。
